近年来，肠癌的发病率逐步上升，并呈现年轻化的趋势。类器官技术的兴起为我们探索肠癌的发病机制和寻找有效治疗靶点提供了新的希望与方向。在人肠癌类器官的培养过程中，需要添加多种生长因子和信号通路调节因子，以模拟肿瘤微环境，从而支持类器官的长期培养。

在初始培养阶段，Wnt信号通路激活因子Wnt-3a和R-spondin-1是维持干细胞增殖和类器官形成的关键因素。同时，BMP信号通路抑制因子Noggin能够抑制BMP信号通路，从而保持干细胞的未分化状态。此外，表皮生长因子EGF有助于促进上皮细胞的增殖，而Rho激酶抑制剂Y-27632则用于抑制细胞凋亡，进而提升干细胞的存活率，通常在初次培养时添加。

在二维持和扩增阶段，Wnt信号通路同样需要R-spondin-1和Wnt-3a的激活，Noggin继续作为BMP信号通路的抑制因子来维持细胞的增殖。TGF-β信号通路抑制剂如A83-01被添加以防止细胞的过度分化。同时，其他小分子抑制剂，如p38MAPK激酶抑制剂SB-202190，可以显著提升类器官的形成效率和稳定性。

在肿瘤特异性培养阶段，BMP信号通路抑制因子Gremlin-1能够显著促进肠癌类器官的生长。此外，IL-6在肿瘤微环境中的表达显著增加，同时也有助于肠癌类器官的生长。

在优化和特殊应用阶段，Notch信号通路激活因子Jagged-1有助于维持类器官的增殖。根据具体实验需求，其他生长因子如HGF和FGF10等也可以相应添加。针对人肠癌类器官培养，基于经典的WNER组合（Wnt-3a、Noggin、EGF和R-spondin-1），并结合肿瘤微环境中的特异性因子（如Gremlin-1和IL-6），能够更好地模拟肠癌的生长环境。

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