树突状细胞（Dendritic cells, DCs）在天然免疫识别病原体及后续的适应性免疫反应激活中扮演着重要角色。虽然DCs存在于多种体内组织中，但由于其数量极少，难以满足科学研究及临床治疗的需求，因此研究者们采用了多种方法进行DC的体外培养与扩增。在小鼠模型中，最常用的方式是通过骨髓细胞诱导获得骨髓来源的树突状细胞（Bone Marrow-Derived Dendritic Cells, BMDCs）。这一过程主要依赖于在粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和白细胞介素-4（IL-4）等细胞因子存在下进行骨髓细胞的体外分化。BMDCs在免疫反应、抗原呈递和细胞免疫调控方面的研究中扮演着关键工具的角色。

近日，上海交通大学药学院的沈琦研究团队在知名学术期刊《Advanced Functional Materials》上发表了题为“Self-adjuvanting bacteria hydrogel for SHP1 checkpoint inhibition in tumor-draining lymph nodes to enhance cancer immunotherapy”的研究成果。该研究中，作者设计的AAM水凝胶系统结合了多种机制，以期通过DCs的免疫活性，提升肿瘤免疫治疗的有效性。研究中使用了重组小鼠GM-CSF和小鼠IL-4对BMDCs进行诱导，结果表明，MHV可以通过甘露糖受体特异性靶向BMDCs，并通过温和的光热效应诱导肿瘤细胞发生免疫原性细胞死亡（ICD），随后释放出肿瘤抗原，以激活BMDCs。

另外，苏州大学FUNSOM的陈倩团队在《Advanced Materials》在线发表了题为“AMinimalist Pathogen-Like Sugar Nanovaccine for Enhanced Cancer Immunotherapy”的研究论文。在这一研究中，作者同样使用了重组小鼠GM-CSF和IL-4来诱导骨髓源细胞转化为BMDCs，以验证疫苗的免疫激活能力、免疫通路及抗原特异性T细胞的增殖效果。

在BMDCs的诱导过程中，使用的试剂包括：6-8周龄的C57BL/6小鼠、解剖用剪刀和钳子、磷酸盐缓冲液（PBS）、离心管、细胞过滤器以及BMDCs培养基。这些试剂的合理运用可以提高BMDCs的诱导效率。在此基础上，关于如何判断树突状细胞是否成熟的问题，成熟的DC通常会在流式细胞术分析中显示出CD11c、MHC-II及CD86等表面标志物的表达。

为了提高BMDC的诱导效率，可以通过优化细胞密度和适当调整细胞因子的浓度来实现。确保GM-CSF与IL-4的稳定性非常重要，可通过避免光照与高温保存这些细胞因子，以保证其活性。同时，及时更换培养液以维持生长因子浓度，对于细胞的高存活率与有效分化至关重要。

在进行诱导时，如遇到细胞生长缓慢或分化不完全的情况，检查GM-CSF和IL-4浓度并适当延长诱导时间是必要的。如果想测试树突状细胞的完全成熟或功能活化，则需通过刺激因子（如LPS、TNF-α等）对BMDCs进行进一步激活。这将增强其免疫功能，包括提高抗原呈递能力和细胞因子的分泌。

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