实验原理是通过脂类染料（如苏丹黑或油红O等）对血清脂蛋白进行预染色，然后将其放置于琼脂糖凝胶板上进行电泳分离。在通电后，脂蛋白会朝着正极移动，并形成多个分离区带。

试剂与器材：

1. 巴比缓冲液（pH 8.6，离子强度 0.075）：作为电极缓冲液，配制成分包括巴比/妥钠154g，巴比/妥276g，EDTA酸0.292g，加水至1000ml。

2. 三羟甲基氨基甲烷缓冲液（pH 8.6）：作为凝胶缓冲液，配制成分包括三羟甲基氨基甲烷12.12g，EDTA酸0.29g，NaCl15.85g，加水至1000ml。

3. 琼脂糖凝胶：琼脂糖0.45g，三羟甲基氨基甲烷缓冲液50ml，水50ml，加热至沸腾，待琼脂糖完全溶解后停止加热。

4. 挖槽工具：制备切口刀，刀片长15mm，中央夹有机玻璃或木片，用螺丝固定，可以保证两刀片相距15mm；挖槽小匙，用直径15mm的铜丝制作，约6cm长，一端锤成扁平状，并用砂纸磨光。

5. 电泳槽和电泳仪：同样的设备可用于血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳。

操作步骤：

1. 预染血清：将0.2ml血清与0.2ml苏丹黑染色液混合于小试管中，置于37℃水浴中染色30分钟后离心（2000转/分，约5分钟）。

2. 制备琼脂糖凝胶板：将0.45%琼脂糖凝胶在沸水中加热融化，使用吸管将凝胶溶液注入载玻片，每片25ml，静置约30分钟使其凝固（在高温环境下可延长时间或放入冰箱中加速凝固）。

3. 点加血清：在已固化的琼脂糖凝胶板一端约2cm处用切口刀片垂直切入凝胶后迅速取出，再用铜丝小匙取出长方形小条凝胶。然后用小片滤纸吸干小槽中的水分，使用血色素吸管吸取经过预染的血清约15μl，注入小槽内。

4. 电泳：将含有血清的凝胶板平行放置于电泳槽中，样品应位于阴极一端。将两块三层纱布浸润于巴比/妥缓冲液中，轻轻紧密贴于凝胶板两端，纱布的另一端浸于电泳槽内的缓冲液（注意：电极缓冲液不能用三羟甲基氨基甲烷缓冲液替代）。接通电源，设定电压为120~130V，电流为每片3~4mA。电泳持续约15至55分钟，便可观察到分离的色带。

注意事项：

1. 电泳样品必须选用新鲜的空腹血清。

2. 每块凝胶可并行挖两个小槽，以便于添加两个样品。

3. 若使用与小槽形状大小相同的有机玻璃片，并在琼脂糖胶固化前固定在适当位置，凝固后取出玻璃片，便可以直接在凝胶板上加样，减少挖槽步骤。

4. 若需保存电泳样本，可以将电泳后的凝胶板（连同玻片）放入清水中浸泡脱盐两小时后，再置于80℃左右的烘箱中烘干。

结果及临床意义：

1. 正常人的血清脂蛋白可展现三条区带，从负极至正极依次为β-脂蛋白（最深）、前β-脂蛋白（较浅）和α-脂蛋白（略深于前β），原点处应无乳糜微粒。

2. 若前β-脂蛋白比α-脂蛋白深，并且血清甘油三酯明显升高、胆固醇正常或略高，可评定为Ⅳ型高脂蛋白血症。

3. 若β-脂蛋白区带明显加深，同时血清总胆固醇增高而甘油三酯正常，即为Ⅱa型；若血清总胆固醇增高而前β稍溶解者，则为Ⅱb型。

4. 若β-与前β区带无法分离，称为“宽β区带”，这时血清甘油三酯和胆固醇均升高，可归为Ⅲ型。

5. 若原点出现乳糜微粒，且β、前β均正常或降低，而甘油三酯明显增高，则可确定为Ⅰ型。

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